| 产品特性：试剂盒 | 产品名称：质粒提取磁珠试剂盒 | 产品等级：工业级 |
| 是否危险化学品：否 | 是否进口：否 | 产地：北京 |
| CAS：/ | 含量≥：99.9％ | 执行质量标准：/ |
| 厂家(产地)：中国 | 品牌：德科岛金 | 型号：/ |
| 规格：100T/瓶 |
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，从样品中分离纯化高质量质粒DNA，特殊包被的磁珠，在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA 的目的。整个过程不涉及有毒试剂，安全、便捷、提取的DNA 纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7～2.0之间，可以应用到各类下游分子生物学实验。
货号 | 名称 | 规格 |
MB-60902-100 | 磁珠法快速质粒DNA提取试剂盒 | 100T |
适用范围
适用于各种质粒DNA 的提取，适用于自动化核酸提取平台。
试剂盒包装及组成
试剂盒组成 | 数量 |
裂解液S1 | 50ml |
裂解液S2 | 20ml |
结合液 | 50ml |
磁珠 | 1.5ml*2 |
洗脱液 | 20ml |
使用说明书 | 1份 |
注意事项
1. 菌种过夜培养OD 值需达到0.1 以上。
2. 磁珠用***定要充分混匀。
3. 取过夜培养的菌液离心后，尽量吸干净上清，否则可能影响质粒纯度。
4. 整个裂解过程操作尽量温和，并在要求时间内完成。
5. 如果菌液浓度较高，则建议磁珠量可适当增加，以获取高浓度质粒。
操作方法
1.裂解
取1-2ml（低拷贝质粒可取2-5ml）过夜培养的菌液至1.5mlEP 管中，12,000rpm 离心1min，尽量吸净上清，加入100μl Buffer A（高拷贝可用50ul），振荡重悬菌体，***无菌块存在。加入100μl Buffer B 温和颠倒混匀6～9 次，至溶液清澈可见，时间3min。加入75μl Buffer C 立即温和颠倒混匀6～9 次，溶液出现絮状沉淀，静置冰上2min 以充分中和。12,000rpm 离心10min。
2.结合
取上清于新的1.5mlEP 管中,加入振荡混匀的磁珠5μl，异丙醇250μl（自备），颠倒混匀5min。将EP 管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液（吸净管盖及管底残液）。
3.洗涤
加入500μl 洗涤液，轻柔混匀1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；
4.洗脱
室温晾干5min，加入100μl 洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2～3min 轻摇EP 管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP 管中，进行下游实验。
常见问题及参考意见
常见问题 | 可能的原因 | 建议 |
得率低 | 大肠杆菌老化 | 涂布平板培养后，重新挑选新菌落进行液体培养 |
未加***或***失效导致质粒丢失 | 确保培养基含有正确、****** | |
菌体浓度太低 | 增加培养前菌体接入量或增加菌体收集（取2～5 ml 菌体离心），或检查***浓度是否过高 | |
培养菌体没在对数生长期早期 | 保存时间较长的菌种,需过夜培养2～3 次后使用 | |
质粒拷贝数低 | 由于使用低拷贝数载体引起的质粒DNA 提取量低，可更换具有相同功能的高拷贝数载体 | |
裂解不充分 | 使用过多菌体培养液，会导致菌体裂解不充分，可减少菌体用量或增加试剂的用量 | |
溶液使用不当 | BufferB和BufferC在温度较低时可能出现浑浊，应置于37℃保温片刻直至溶解为清亮的溶液，才能使用 | |
裂解时间过长 | 加入BufferB后裂解时间不超过5分钟 | |
结合不充分 | 结合过程中要使磁珠一直处于悬浮状态，结合时间严格按照说明书 | |
洗脱液减少 | 根据需要可适当减少洗脱液用量（≥30μl）增加质粒产量 |
